Ekspresi Protein Bernilai Tinggi pada Tembakau: Human Serum Albumin

SELAMAT DATANG DI WEB SITE PUSAT PENELITIAN BIOTEKNOLOGI LIPI

Ekspresi Protein Bernilai Tinggi pada Tembakau: Human Serum Albumin Tuesday, 30 November 1999 00:00 Pelaksana : Arief Budi Witarto, Desriani, Rahayu, Suwarti, Ahmad Furqoni Abstrak Pertumbuhan tembakau transgenik var. Petit Havana SR 1 yang mengandung gen target human serum albumin/HSA dan gen penanda OsRed dengan tembakau var. yang sarna tapi non-transgenik di rumah kaca transgenik pada dataran tinggi dan dalam pot, tidak menunjukkan perbedaan tinggi dan jumlah daun/biomassa. Data pertumbuhan tembakau var. lokal sebanyak 13 jenis pada dataran tinggi dalam tanah juga telah diperoleh termasuk biomassa (260-1.100 g) dan waktu berbunga (68-8 I hari). Penanaman pada kondisi yang di sama dalam pot di data ran rendaha menunjukkan tembakau var. lokal menghasilkan biomassa dua kali lipat lebih besar daripada tembakau var. SRI. Pemurnian protein rekombinan dari daun telah dilakukan dengan lIpaya awal untuk memurnikan OsRed. Menggunakan pengendapan ammonium sulfat dan kromatografi kolom penukar anion OEAE-Sepharose, telah diperoleh fraksi yang mengandung protein OsRed murni seperti dikonfirmasi dengan SDS-PAGE, fluoresens spektroskopi dan aktivitas fluoresensinya. Data pertumbuhan induksi tunas pada 18 jenis tembakau var. lokal telah diperoleh dengan tingkat kemampuan 60- 100 %. Transformasi pada tembakau var. lokal menggunakan bantuan Agrobacterium tumefaciens dan plasmid pCAMBIA 2310 telah berhasil dilakukan. Ekspresi protein target HSA telah dikonfirmasi pada tembakau var. SR 1 menggunakan Western Blot dan ELISA. Pada daun, diperoleh tingkat ekspresi 2,7-5,0 µg/g daun basah. Hasil ini sebanding dengan data yang diperoleh di Fraunhofer IME-Jerman.